医药数据
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 3519 人凝血因子Ⅸ效价测定法 |
药典2015版 |
（一期法）
本法系用人凝血因子Ⅸ缺乏血浆为基质血浆，采用一期法测定供试品人凝血因子Ⅸ效价。
试剂 （1）3.8%枸橼酸钠溶液 称取无水枸橡酸钠9.5g，加水溶解并稀释至250ml。
（2）咪唑缓冲液（pH7.3） 称取咪唑0.68g、氯化钠1.17g，溶于100ml水中，加入0.1mol/L盐酸溶液42.2ml，再加水稀释至200ml，即得。
（3）稀释液 取1体积的3.8%枸橼酸钠加入5体积咪唑缓冲液，混合，加适量20%人血白蛋白至终浓度为1%。
（4）激活的部分凝血活酶（APTT）试剂，
（5）人凝血因子Ⅸ缺乏血浆 为人凝血因子Ⅸ含量低于1%的人血浆或人工基质血浆。
（6）生理氯化钠溶液。
（7）0.05mol/L氯化钙溶液 称取氯化钙（CaCl2?2H2O）147g，加水溶解并稀释至1000ml，配制成1mol/L氯化钙贮存液。临用前，用水稀释20倍，配制成0.05mol/L氯化钙溶液。
人凝血因子Ⅸ标准品溶液的制备 用人凝血因子Ⅸ缺乏血浆或生理氯化钠溶液将标准品稀释成每1ml含1IU凝血因子Ⅸ，再用稀释液分别做10倍、20倍、40倍和80倍稀释，置冰浴待用。
供试品溶液的制备 若供试品中含有肝素，先用硫酸鱼精蛋白中和供试品中的肝素。测定时先用人凝血因子Ⅸ缺乏血浆或生理氯化钠溶液稀释成每1ml约含1IU凝血因子Ⅸ，再用稀释液做10倍、20倍或40倍稀释，置冰浴待用。
测定法 取激活的部分凝血活酶试剂0.1ml，置37℃水浴中保温一定时间（一般4分钟），加入凝血因子Ⅸ缺乏血浆0.1ml、供试品溶液0.1ml，混匀，置37℃水浴中保温一定时间（一般5分钟），加入已预热至37℃的0.05mol/L氯化钙溶液0.1ml，记录凝固时间。
用不同稀释度的人凝血因子Ⅸ标准品溶液0.1ml替代供试品溶液，同法操作。
以人凝血因子Ⅸ标准品溶液效价（IU/ml）的对数对其相应的凝固时间（秒）的对数作直线回归，求得直线回归方程，计算供试品溶液人凝血因子Ⅸ效价，再乘以稀释倍数，即为供试品人凝血因子Ⅸ效价（IU/ml）。
【附注】（1）直线回归相关系数应不低于0.98，
（2）测定时要求每个稀释度平行测定2管，2管之差不得超过均值10%，否则重测。
（3）直接与标准品、供试品和血浆接触的器皿应为塑料制品或硅化玻璃制品。
（4）采用全自动凝血仪操作，按仪器使用说明书进行。
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